Пестициди у потоцима све више постају глобална брига, али постоји мало информација о безбедној концентрацији водених екосистема.У 30-дневном мезокосмичком експерименту, домаћи бентоски водени бескичмењаци били су изложени уобичајеном инсектициду фипронилу и четири врсте производа разградње.Једињење фипронила изазвало је промене у настанку и трофичкој каскади.Развијена је ефективна концентрација (ЕЦ50) при којој фипронил и његови производи разградње сулфида, сулфона и десулфинила изазивају 50% одговора.Таксани нису осетљиви на фипронил.Концентрација опасности од 5% погођених врста из 15 мезокосмичких ЕЦ50 вредности се користи за претварање концентрације једињења фипронила у теренском узорку у збир токсичних јединица (∑ТУФипронилс).У 16% токова добијених из пет регионалних студија, просек ∑ТУФипронила је премашио 1 (што указује на токсичност).Индикатори бескичмењака ризичних врста су у негативној корелацији са ТУТУипронилом у четири од пет области узорковања.Ова процена еколошког ризика показује да ће ниске концентрације једињења фипронила смањити поточне заједнице у многим деловима Сједињених Држава.
Иако је производња синтетичких хемикалија у великој мери порасла последњих деценија, утицај ових хемикалија на нециљане екосистеме није у потпуности схваћен (1).У површинским водама где је изгубљено 90% глобалног пољопривредног земљишта, нема података о пољопривредним пестицидима, али тамо где постоје подаци, време да пестициди пређу регулаторне прагове је половина (2).Мета-анализа пољопривредних пестицида у површинским водама у Сједињеним Државама показала је да је на 70% локација за узорковање најмање један пестицид премашио регулаторни праг (3).Међутим, ове мета-анализе (2, 3) се фокусирају само на површинске воде на које утиче коришћење пољопривредног земљишта, и представљају резиме дискретних студија.Пестициди, посебно инсектициди, такође постоје у високим концентрацијама у дренажи урбаног пејзажа (4).Ретко се спроводи свеобухватна процена пестицида у површинским водама које се испуштају из пољопривреде и урбаних предела;стога, није познато да ли пестициди представљају велику опасност за ресурсе површинских вода и њихов еколошки интегритет.
Бензопиразоли и неоникотиноиди су чинили једну трећину глобалног тржишта пестицида у 2010. (5).У површинским водама у Сједињеним Државама, фипронил и производи његове деградације (фенилпиразоли) су најчешћа једињења пестицида, а њихове концентрације обично премашују водене стандарде (6-8).Иако су неоникотиноиди привукли пажњу због свог дејства на пчеле и птице и њихове распрострањености (9), фипронил је токсичнији за рибе и птице (10), док друга једињења из класе фенилпиразола имају хербицидна дејства (5).Фипронил је системски инсектицид који се користи за сузбијање штеточина у урбаним и пољопривредним срединама.Откако је фипронил ушао на светско тржиште 1993. године, употреба фипронила у Сједињеним Државама, Јапану и Уједињеном Краљевству се значајно повећала (5).У Сједињеним Државама, фипронил се користи за контролу мрава и термита, а користи се у усевима укључујући кукуруз (укључујући третман семена), кромпир и воћњаке (11, 12).Пољопривредна употреба фипронила у Сједињеним Државама достигла је врхунац 2002. (13).Иако нису доступни национални подаци о урбаној употреби, урбана употреба у Калифорнији достигла је врхунац 2006. и 2015. (хттпс://цалпип.цдпр.ца) .гов/маин .цфм, приступљено 2. децембра 2019.).Иако се високе концентрације фипронила (6,41 μг/Л) налазе у токовима у неким пољопривредним областима са високим стопама примене (14), у поређењу са пољопривредним токовима, урбани токови у Сједињеним Државама генерално имају више детекције и веће високе концентрације, позитивне за појава олуја је повезана са тестом (6, 7, 14-17).
Фипронил улази у водени екосистем отицања или испире из земљишта у поток (7, 14, 18).Фипронил има ниску испарљивост (Хенријева законска константа 2,31×10-4 Па м3 мол-1), ниску до умерену растворљивост у води (3,78 мг/л на 20°Ц) и умерену хидрофобност (лог Ков је 3,9 до 4,1)). покретљивост у земљишту је веома мала (лог Коц је 2,6 до 3,1) (12, 19), а испољава ниску до средњу постојаност у животној средини (20).Финазеприл се разграђује фотолизом, оксидацијом, пХ-зависном хидролизом и редукцијом, формирајући четири главна производа разградње: дессулфоксифенаприл (нити сулфоксид), фенапренип сулфон (сулфон), филофенамид (амид) и филофениб сулфид (сулфид).Производи разградње фипронила имају тенденцију да буду стабилнији и издржљивији од матичног једињења (21, 22).
Токсичност фипронила и његова деградација у нециљне врсте (као што су водени бескичмењаци) је добро документована (14, 15).Фипронил је неуротоксично једињење које омета пролаз хлоридних јона кроз хлоридни канал регулисан гама-аминомаслачном киселином код инсеката, што резултира довољном концентрацијом да изазове претерано узбуђење и смрт (20).Фипронил је селективно токсичан, тако да има већи афинитет везивања за рецепторе за инсекте него за сисаре (23).Инсектицидна активност продуката разградње фипронила је различита.Токсичност сулфона и сулфида за слатководне бескичмењаке је слична или већа него код матичног једињења.Десулфинил има умерену токсичност, али је мање токсичан од матичног једињења.Релативно нетоксичан (23, 24).Осетљивост водених бескичмењака на разградњу фипронила и фипронила увелико варира унутар и између таксона (15), ау неким случајевима чак прелази ред величине (25).Коначно, постоје докази да су фенилпиразоли токсичнији за екосистем него што се раније мислило (3).
Водена биолошка мерила заснована на лабораторијском тестирању токсичности могу потценити ризик од пољских популација (26-28).Водени стандарди се обично утврђују лабораторијским испитивањем токсичности за једну врсту користећи једну или више врста водених бескичмењака (на пример, Диптера: Цхирономидае: Цхирономус и Црустацеа: Дапхниа магна и Хиалелла азтеца).Ове тест организме је генерално лакше узгајати него друге бентоске макробескичмењаке (на пример, род пхе::), а у неким случајевима су мање осетљиви на загађиваче.На пример, Д. Магна је мање осетљива на многе метале од одређених инсеката, док је А. зтеца мање осетљива на пиретроидни инсектицид бифентрин од његове осетљивости на црве (29, 30).Још једно ограничење постојећих бенчмарка су крајње тачке које се користе у прорачунима.Акутна мерила су заснована на морталитету (или фиксна за ракове), док су хронична мерила обично заснована на сублеталним крајњим тачкама (као што су раст и репродукција) (ако их има).Међутим, постоје широко распрострањени сублетални ефекти, као што су раст, појављивање, парализа и кашњење у развоју, који могу утицати на успех таксона и динамику заједнице.Као резултат тога, иако бенчмарк пружа позадину за биолошку важност ефекта, еколошка релевантност као праг токсичности је неизвесна.
Да би се боље разумели ефекти једињења фипронила на бентоске водене екосистеме (бескичмењаке и алге), природне бентоске заједнице су донете у лабораторију и изложене градијентима концентрације током 30-дневног протока Фипронила или једног од четири експеримента деградације фипронила.Циљ истраживања је да се произведе специфична концентрација од 50% ефекта (ЕЦ50 вредност) за свако једињење фипронила које представља широку својту речне заједнице и да се утврди утицај загађивача на структуру и функцију заједнице [тј. концентрација опасности] 5 % погођених врста (ХЦ5) и индиректни ефекти као што су измењена појава и трофичка динамика].Затим је праг (вредност ХЦ5 специфичне за једињење) добијен из мезоскопског експеримента примењен на поље које је прикупио Геолошки завод Сједињених Држава (УСГС) из пет региона Сједињених Држава (североисток, југоисточни, средњи запад, северозападни Пацифик и централна Калифорнија Подаци о обалној зони) као део процене квалитета регионалног тока УСГС (хттпс://вебаппс.усгс.гов/рска/#!/).Колико знамо, ово је прва процена еколошког ризика.Свеобухватно истражује ефекте једињења фипронила на бентоске организме у контролисаном мезо-окружењу, а затим примењује ове резултате на процене терена на континенталном нивоу.
30-дневни мезокосмички експеримент спроведен је у УСГС Акуатиц Лаборатори (АКСЛ) у Форт Колинсу, Колорадо, САД од 18. октобра до 17. новембра 2017, током 1 дана припитомљавања и 30 дана експериментисања.Метода је претходно описана (29, 31) и детаљно описана у додатном материјалу.Подешавање мезопростора садржи 36 циркулационих токова у четири активна тока (резервоари за циркулацију воде).Сваки живи ток опремљен је хладњаком за одржавање температуре воде и осветљен је циклусом светлости и таме 16:8.Проток мезо-нивоа је нерђајући челик, који је погодан за хидрофобност фипронила (лог Ков = 4,0) и погодан за органске раствараче за чишћење (слика С1).Вода коришћена за експеримент мезо-размера сакупљена је из реке Цацхе Ла Поудре (узводни извори укључујући Национални парк Роцки Моунтаин, Националну шуму и Цонтинентал Дивиде) и ускладиштена у АКСЛ-ова четири полиетиленска резервоара за складиштење.Претходне процене узорака седимента и воде прикупљених са локације нису откриле никакве пестициде (29).
Дизајн експеримента на мезо-скали састоји се од 30 токова обраде и 6 контролних токова.Струја за третман прима третирану воду, од којих свака садржи непоновљене константне концентрације једињења фипронила: фипронил (фипронил (Сигма-Алдрицх, ЦАС 120068-37-3), амид (Сигма-Алдрицх, ЦАС 205650-69-7), група за одсумпоравање [Библиотека пестицида Агенције за заштиту животне средине САД (ЕПА), ЦАС 205650-65-3], сулфон (Сигма-Алдрицх, ЦАС 120068-37-2) и сулфид (Сигма-Алдрицх, ЦАС 120067-83-6); све чистоће); 97,8%. Према објављеним вредностима одговора (7, 15, 16, 18, 21, 23, 25, 32, 33). Растварањем једињења фипронила у метанолу (Тхермо Фисхер Сциентифиц, ниво сертификата Америчког хемијског друштва) и разблажити дејонизованом водом до потребне запремине за припрему концентрованог основног раствора. Пошто је количина метанола у дози различита, неопходно је додати метанол у све токове третмана по потреби. У три контроле, да би се обезбедила иста концентрација метанола ( 0,05 мл/Л) у токовима.Средњи поглед на остала три контролна тока добијала је речну воду без метанола, иначе су третирани као и сви остали токови.
Осмог, 16. и 26. дана мерене су температура, пХ вредност, електрична проводљивост и деградација фипронила и фипронила у проточној мембрани.Да би се пратила деградација матичног једињења фипронила током теста медија, фипронил (родитељи) је коришћен за третирање течне цревне слузокоже још три дана [5., 12. и 21. дан (н = 6)] за температуру, пХ, Узорковање проводљивости, деградације фипронила и фипронила.Узорци за анализу пестицида су сакупљени филтрирањем 10 мл текуће воде у бочицу од ћилибарног стакла од 20 мл кроз филтер шприца Вхатман 0,7 μм ГФ/Ф опремљен иглом великог пречника.Узорци су одмах замрзнути и послати у Националну лабораторију за квалитет воде УСГС (НВКЛ) у Лејквуду, Колорадо, САД на анализу.Користећи побољшану методу претходно објављене методе, Фипронил и 4 продукта разградње у узорцима воде су одређени течном хроматографијом са директном воденом ињекцијом (ДАИ)-тандем масеном спектрометријом (ЛЦ-МС / МС; Агилент 6495).Ниво детекције инструмента (ИДЛ) је процењен као минимални стандард за калибрацију који задовољава стандард квалитативне идентификације;ИДЛ фипронила је 0,005 μг/Л, а ИДЛ остала четири фипронила је 0,001 μг/Л.Додатни материјал пружа потпун опис метода које се користе за мерење једињења фипронила, укључујући процедуре контроле квалитета и осигурања (на пример, враћање узорка, шиљци, инспекције треће стране и слепе слике).
На крају 30-дневног мезокосмичког експеримента завршено је пописивање и идентификација одраслих бескичмењака и ларви (главна крајња тачка прикупљања података).Одрасле јединке у настајању се сакупљају из мреже сваког дана и замрзавају у чистој Фалцон центрифугалној епрувети од 15 мл.На крају експеримента (30. дан), садржај мембране у свакој струји је очишћен да би се уклонили сви бескичмењаци, и просијан (250 μм) и ускладиштен у 80% етанолу.Тимберлине Акуатицс (Форт Цоллинс, ЦО) је завршио таксономску идентификацију ларви и одраслих бескичмењака до најнижег могућег таксономског нивоа, обично врста.Дана 9, 19 и 29, хлорофил а је мерен у три примерка у мезоскопској мембрани сваког тока.Сви хемијски и биолошки подаци као део мезоскопског експеримента дати су у пропратном саопштењу (35).
Еколошка истраживања су обављена у малим (мотајућим) потоцима у пет главних области Сједињених Држава, а пестициди су праћени током претходног индексног периода.Укратко, на основу коришћења пољопривредног и урбаног земљишта (36-40), одабрано је 77 до 100 локација у сваком региону (укупно 444 локације).Током пролећа и лета једне године (2013-2017), узорци воде се сакупљају једном недељно у сваком региону током 4 до 12 недеља.Конкретно време зависи од региона и интензитета развоја.Међутим, 11 станица у североисточном региону су скоро у разводу.Нема развоја, осим што је сакупљен само један узорак.Пошто су периоди праћења пестицида у регионалним студијама различити, за поређење, овде се разматрају само последња четири узорка прикупљена на свакој локацији.Претпоставља се да један узорак прикупљен на неразвијеном североисточном локалитету (н = 11) може представљати период узорковања од 4 недеље.Ова метода доводи до истог броја посматрања пестицида (осим 11 локација на североистоку) и истог трајања посматрања;Верује се да је 4 недеље довољно дуго за дуготрајну изложеност биоти, али довољно кратко да се еколошка заједница не би требало опоравити од ових контаката.
У случају довољног протока, узорак воде се сакупља уз помоћ константне брзине и константне ширине (41).Када проток није довољан за коришћење ове методе, узорке можете сакупљати дубоком интеграцијом узорака или хватањем из центра гравитације тока.Користите шприц великог пречника и диск филтер (0,7 μм) да сакупите 10 мл филтрираног узорка (42).Путем ДАИ ЛЦ-МС/МС/МС/МС, узорци воде су анализирани на НВКЛ за 225 пестицида и производа разградње пестицида, укључујући фипронил и 7 производа разградње (дессулфинил фипронил, фипронил) сулфиде, фипронил сулфон, десхлорофипронил, дестиоламид, фипронил, фипронил и фипронил).).Типични минимални нивои извештавања за теренске студије су: фипронил, десметилтио флуоробензонитрил, фипронил сулфид, фипронил сулфон и десхлорофипронил 0,004 μг/Л;дессулфинил флуорфенамид и Концентрација фипронил амида је 0,009 μг/литар;концентрација фипронил сулфоната је 0,096 μг/л.
Заједнице бескичмењака се узоркују на крају сваке студије подручја (пролеће/лето), обично у исто време када и последњи догађај узорковања пестицида.Након сезоне раста и велике употребе пестицида, време узорковања треба да буде у складу са условима ниског протока и требало би да се поклопи са временом када заједница речних бескичмењака сазрева и углавном је у фази живота ларве.Коришћењем Сурбер узоркивача са мрежом од 500 μм или мрежом Д-оквира, узорковање заједнице бескичмењака је завршено на 437 од 444 локације.Метода узорковања је детаљно описана у додатном материјалу.На НВКЛ, сви бескичмењаци су обично идентификовани и наведени на нивоу рода или врсте.Сви хемијски и биолошки подаци прикупљени у овој области и коришћени у овом рукопису могу се наћи у пропратном саопштењу (35).
За пет једињења фипронила коришћених у мезоскопском експерименту, израчуната је концентрација ларви бескичмењака смањена за 20% или 50% у односу на контролу (тј. ЕЦ20 и ЕЦ50).Подаци [к = временски пондерисана концентрација фипронила (погледајте додатни материјал за детаље), и = бројност ларви или друге метрике] су уграђени у Р(43) проширени пакет коришћењем тропараметарске логаритамске регресионе методе “дрц”.Крива одговара свим врстама (ларвама) са довољном бројношћу и задовољава друге метрике од интереса (на пример, богатство таксона, укупна бројност мајмуна и укупно обиље) да би се даље разумео ефекат заједнице.Неш-Сатклиф коефицијент (45) се користи за процену уклапања модела, при чему лоше уклапање модела може добити бесконачне негативне вредности, а вредност савршеног уклапања је 1.
Да би се истражили ефекти једињења фипронила на појаву инсеката у експерименту, подаци су процењени на два начина.Прво, одузимањем просечног изгледа мезо контролног тока од изгледа сваког мезо тока третмана, кумулативна дневна појава инсеката из сваког мезо тока (укупан број свих индивидуа) је нормализована на контролу.Зацртајте ове вредности у односу на време да бисте разумели одступање медијатора течности за третман од медијатора контролне течности у експерименту од 30 дана.Друго, израчунајте укупан проценат појављивања сваког мезофила тока, који је дефинисан као однос укупног броја мезофила у датом току према просечном броју ларви и одраслих јединки у контролној групи, и погодан је за тропараметарску логаритамску регресију. .Сви прикупљени инсекти клијачи били су из две потфамилије породице Цхирономидае, па је урађена комбинована анализа.
Промене у структури заједнице, као што је губитак таксона, могу на крају да зависе од директних и индиректних ефеката токсичних супстанци и могу довести до промена у функцији заједнице (на пример, трофичка каскада).Да би се тестирала трофичка каскада, процењивана је једноставна каузална мрежа методом анализе путање (Р пакет „пиецевисеСЕМ“) (46).За мезоскопске експерименте претпоставља се да фипронил, десулфинил, сулфид и сулфон (није тестиран амид) у води за смањење биомасе стругача индиректно доводе до повећања биомасе хлорофила а (47).Концентрација једињења је предикторска варијабла, а стругач и биомаса хлорофила су варијабле одговора.Фишерова Ц статистика се користи за процену уклапања модела, тако да П вредност <0,05 указује на добро уклапање модела (46).
Да би се развило средство за заштиту еко заједнице засновано на ризику, свако једињење је добило 95% захваћене врсте (ХЦ5), дистрибуцију осетљивости хроничних врста (ССД) и заштиту концентрације опасности.Генерисана су три ССД скупа података: (и) само мезо скуп података, (ии) скуп података који садржи све мезо податке и податке прикупљене из упита базе података ЕПА ЕЦОТОКС (хттпс://цфпуб.епа.гов/ецоток) /, приступљено на 14. марта 2019.), трајање студије је 4 дана или дуже, и (иии) скуп података који садржи све мезоскопске податке и ЕЦОТОКС податке, у којима ЕЦОТОКС подаци (акутна изложеност) подељени са акутним и Однос хроничне Д. магна ( 19.39) да би се објаснила разлика у трајању излагања и апроксимирала хронична ЕЦ50 вредност (12).Наша сврха генерисања више ССД модела је да (и) развијемо ХЦ5 вредности за поређење са теренским подацима (само за ССД за медије) и (ии) проценимо да су медијски подаци више прихваћени од регулаторних агенција за укључивање у аквакултуру. робусност животних мерила и стандардно постављање ресурса података, а самим тим и изводљивост коришћења мезоскопских студија за процес прилагођавања.
ССД је развијен за сваки скуп података коришћењем Р пакета „ссдтоолс“ (48).Користите боотстрап (н = 10.000) да процените ХЦ5 просек и интервал поверења (ЦИ) са ССД-а.Четрдесет девет одговора таксона (сви таксони који су идентификовани као род или врсте) развијени кроз ово истраживање су комбиновани са 32 одговора таксона сакупљених из шест објављених студија у бази података ЕЦОТОКС, за укупно 81 одговор таксона који се може користити за развој ССД-а .Пошто у бази података ЕЦОТОКС о амидима нису пронађени подаци, није развијен ССД за амиде и добијен је само један ЕЦ50 одговор из тренутне студије.Иако је ЕЦ50 вредност само једне сулфидне групе пронађена у бази података ЕЦОТОКС, тренутни дипломирани студент има 12 ЕЦ50 вредности.Због тога су развијени ССД-ови за сулфинил групе.
Специфичне вредности ХЦ5 за једињења фипронила добијене само из скупа података ССД Месоцосмоса комбиноване су са теренским подацима да би се проценила изложеност и потенцијална токсичност једињења фипронила у 444 тока из пет региона у Сједињеним Државама.У последњем периоду узорковања од 4 недеље, свака откривена концентрација једињења фипронила (неоткривене концентрације су нула) подељена је са одговарајућим ХЦ5, а однос једињења сваког узорка се сумира да би се добила јединица укупне токсичности фипронила (ΣТУФипронилс), где је ΣТУФипронилс> 1 значи токсичност.
Упоређивањем концентрације опасности од 50% погођених врста (ХЦ50) са ЕЦ50 вредношћу богатства таксона добијеном из експеримента са средњом мембраном, ССД добијен из података о мембрани средње величине је процењен да одражава осетљивост шире еколошке заједнице на фипронил степен..Кроз ово поређење, конзистентност између ССД методе (укључујући само оне таксоне са односом доза-одговор) и ЕЦ50 методе (укључујући све јединствене таксоне уочене у средњем простору) помоћу ЕЦ50 методе мерења богатства таксона може се проценити Пол.Однос одговора на дозу.
Индикатор врсте ризика од пестицида (СПЕАРпестицидес) је израчунат да би се истражио однос између здравственог статуса заједница бескичмењака и ΣТУФипронила у 437 токова који сакупљају бескичмењаке.СПЕАРпестицидес метрика претвара састав бескичмењака у метрику обиља за биолошку таксономију са физиолошким и еколошким карактеристикама, чиме се даје осетљивост на пестициде.Индикатор СПЕАРпестицида није осетљив на природне коваријате (49, 50), иако ће на његов учинак утицати озбиљна деградација станишта (51).Подаци о обиљу прикупљени на лицу места за сваки таксон усклађени су са кључном вредношћу таксона у вези са софтвером АСТЕРИЦС за процену еколошког квалитета реке (хттпс://геваессер-бевертунг-берецхнунг.де/индек.пхп/хоме .хтмл).Затим увезите податке у софтвер Индицате (хттп://системецологи.еу/индицате/) (верзија 18.05).У овом софтверу, европска база података о особинама и база података са физиолошком осетљивошћу на пестициде се користе за претварање података сваке локације у СПЕАРпестициде индикатор.Свака од пет регионалних студија користила је Општи адитивни модел (ГАМ) [пакет „мгцв“ у Р(52)) да би истражила однос између СПЕАРпестициде метриц и ΣТУФипронилс [лог10(Кс + 1) конверзије] Ассоциатед.За детаљније информације о СПЕАРпестицид метрикама и за анализу података, погледајте Додатни материјали.
Индекс квалитета воде је конзистентан у сваком мезоскопском току и читавом мезоскопском експерименталном периоду.Просечна температура, пХ и проводљивост били су 13,1°Ц (±0,27°Ц), 7,8 (±0,12) и 54,1 (±2,1) μС/цм (35), респективно.Измерени растворени органски угљеник у чистој речној води је 3,1 мг/Л.У мезо-приказу реке где је постављен МиниДОТ снимач, растворени кисеоник је близу засићења (просек > 8,0 мг/Л), што указује да је ток у потпуности циркулисао.
Подаци о контроли квалитета и обезбеђењу квалитета фипронила дати су у пропратном саопштењу (35).Укратко, стопе опоравка шиљака лабораторијске матрице и мезоскопских узорака обично су у прихватљивим границама (опоравак од 70% до 130%), ИДЛ стандарди потврђују квантитативну методу, а празнине у лабораторији и инструментима су обично чисти. Постоји врло мало изузетака осим ове генерализације о којима се говори у додатном материјалу..
Због дизајна система, измерена концентрација фипронила је обично нижа од циљне вредности (слика С2) (јер је потребно 4 до 10 дана да се постигне стабилно стање у идеалним условима) (30).У поређењу са другим једињењима фипронила, концентрација десулфинила и амида се мало мења током времена, а варијабилност концентрације унутар третмана је мања од разлике између третмана, осим за третман ниске концентрације сулфона и сулфида.Временски пондерисани просечни измерени опсег концентрација за сваку третирану групу је следећи: Фипронил, ИДЛ до 9,07 μг/Л;Десулфинил, ИДЛ до 2,15 μг/Л;Амид, ИДЛ до 4,17 μг/Л;Сулфид, ИДЛ До 0,57 μг/литар;и сулфон, ИДЛ је 1,13 μг/литар (35).У неким токовима, откривена су нециљана једињења фипронила, то јест, једињења која нису додата у специфичан третман, али је познато да су продукти разградње једињења за третман.Мезоскопске мембране третиране матичним једињењем фипронилом имају највећи број откривених нециљаних производа разградње (када се не користе као једињење за обраду, то су сулфинил, амид, сулфид и сулфон);ово може бити последица производног процеса Нечистоће једињења и/или процеса деградације који се јављају током складиштења основног раствора и (или) у мезоскопском експерименту, а не резултат унакрсне контаминације.Код третмана фипронилом није примећен тренд концентрације деградације.Једињења која нису циљна деградација се најчешће детектују у телу са највећом концентрацијом третмана, али је концентрација мања од концентрације ових нециљних једињења (погледајте следећи одељак за концентрацију).Због тога, пошто се једињења која нису циљна деградација обично не детектују у најнижем третману фипронилом, и пошто је детектована концентрација нижа од концентрације ефекта у највишем третману, закључује се да ова нециљана једињења имају минималан утицај на анализу.
У експериментима са медијима, бентоски макробескичмењаци су били осетљиви на фипронил, десулфинил, сулфон и сулфид [Табела С1;оригинални подаци о обиљу су дати у пратећој верзији података (35)].Фипронил амид је само за муву Рхитхрогена сп.Токсичан (фатално), његов ЕЦ50 је 2,05 μг/Л [±10,8 (СЕ)].Генерисане су криве доза-одговор за 15 јединствених таксона.Ове таксоне су показале морталитет у оквиру тестираног опсега концентрација (Табела С1), и циљане груписане таксоне (као што су муве) (Слика С3) и богате таксоне (Слика 1). Генерисана је крива одговора на дозу.Концентрација (ЕЦ50) фипронила, десулфинила, сулфона и сулфида на јединственим таксонима најосетљивијих таксона креће се од 0,005-0,364, 0,002-0,252, 0,002-0,061 и 0,005-0,043 μг/Л, респективно.Рхитхрогена сп.И Свелтса сп.;Слика С4) су ниже од таксона који се толеришу (као што су Мицропсецтра / Танитарсус и Лепидостома сп.) (Табела С1).Према просечном ЕЦ50 сваког једињења у табели С1, сулфони и сулфиди су најефикаснија једињења, док су бескичмењаци генерално најмање осетљиви на десулфинил (искључујући амиде).Метрике укупног еколошког статуса, као што су богатство таксона, укупна бројност, укупни пентаплоид и укупна камена мува, укључујући таксоне и обиље неких таксона, веома су ретки у мезо и не могу се израчунати. Нацртајте засебну криву одговора на дозу.Стога, ови еколошки индикатори укључују одговоре таксона који нису укључени у ССД.
Богатство таксона (ларва) са тростепеном логистичком функцијом (А) фипронила, (Б) десулфинила, (Ц) сулфона и (Д) концентрације сулфида.Свака тачка података представља ларве из једног тока на крају 30-дневног мезо експеримента.Богатство таксона је број јединствених таксона у сваком току.Вредност концентрације је временски пондерисани просек уочене концентрације сваког тока измерена на крају 30-дневног експеримента.Фипронил амид (није приказан) нема везе са богатим таксонима.Имајте на уму да је к-оса на логаритамској скали.ЕЦ20 и ЕЦ50 са СЕ приказани су у табели С1.
На највишој концентрацији од свих пет једињења фипронила, стопа ницања Уетридае је опала.Примећено је смањење процента клијања (ЕЦ50) сулфида, сулфона, фипронила, амида и десулфинила за 50% при концентрацијама од 0,03, 0,06, 0,11, 0,78 и 0,97 μг/Л респективно (Слика 2 и Слика С5).У већини 30-дневних експеримената, сви третмани фипронилом, десулфинилом, сулфоном и сулфидом су одложени, осим неких третмана са ниском концентрацијом (слика 2), и њихова појава је инхибирана.У третману амидом, акумулирани ефлуент током целог експеримента је био већи од контролног, са концентрацијом од 0,286 μг/л.Највећа концентрација (4,164 μг/литар) током целог експеримента је инхибирала ефлуент, а брзина ефлуента међутретмана била је слична оној у контролној групи.(слика 2).
Кумулативна емергенца је просечна дневна просечна појава сваког третмана минус (А) фипронил, (Б) десулфинил, (Ц) сулфон, (Д) сулфид и (Е) амид у контролној струји. Просечна дневна просечна појава мембране.Осим за контролу (н = 6), н = 1. Вредност концентрације је временски пондерисани просек посматране концентрације у сваком току.
Крива доза-одговор показује да, поред таксономских губитака, долази до структурних промена на нивоу заједнице.Конкретно, у опсегу тестираних концентрација, обиље маја (Слика С3) и обиље таксона (Слика 1) показало је значајне односе доза-одговор са фипронилом, десулфинилом, сулфоном и сулфидом.Стога смо истражили како ове структурне промене доводе до промена у функцији заједнице тестирањем нутритивне каскаде.Изложеност водених бескичмењака фипронилу, десулфинилу, сулфиду и сулфону има директан негативан утицај на биомасу стругача (слика 3).У циљу контроле негативног утицаја фипронила на биомасу стругача, стругач је негативно утицао и на биомасу хлорофила а (слика 3).Резултат ових негативних коефицијената пута је нето повећање хлорофила а како се повећава концентрација фипронила и деграданта.Ови потпуно посредовани модели путева показују да повећана деградација фипронила или фипронила доводи до повећања удела хлорофила а (Слика 3).Претпоставља се унапред да је директан ефекат између фипронила или концентрације разградње и биомасе хлорофила а нула, јер су једињења фипронила пестициди и имају ниску директну токсичност за алге (на пример, основна концентрација ЕПА акутне неваскуларне биљке је 100 μг/Л фипронил, дисулфоксидна група, сулфон и сулфид; хттпс://епа.гов/пестициде-сциенце-анд-ассессинг-пестициде-рискс/акуатиц-лифе-бенцхмаркс-анд-ецологицал-риск), сви резултати (важећи модели) подржавају ово хипотеза.
Фипронил може значајно да смањи биомасу (директан ефекат) испаше (група стругача су ларве), али нема директан утицај на биомасу хлорофила а.Међутим, снажан индиректни ефекат фипронила је повећање биомасе хлорофила а као одговор на мање испаше.Стрелица означава стандардизовани коефицијент путање, а знак минус (-) означава правац повезивања.* Означава степен важности.
Три ССД-а (само средњи слој, средњи слој плус ЕЦОТОКС подаци и средњи слој плус ЕЦОТОКС подаци исправљени за разлике у трајању излагања) дала су номинално различите вредности ХЦ5 (Табела С3), али су резултати били унутар СЕ опсега.У остатку ове студије, фокусираћемо се на ССД података са само мезо универзумом и сродном вредношћу ХЦ5.За потпунији опис ова три ССД евалуације, молимо погледајте додатне материјале (табеле С2 до С5 и слике С6 и С7).Најприкладнија дистрибуција података (најнижи стандард Акаике информација) од четири једињења фипронила (Слика 4) која се користе само у мезо-чврсти ССД мапи је лог-гумбел фипронила и сулфона, и веибулл сулфида И десулфуризованог γ ( Табела С3).Вредности ХЦ5 добијене за свако једињење су приказане на слици 4 само за мезо универзум, ау табели С3 приказане су вредности ХЦ5 из сва три скупа података ССД.Вредности ХЦ50 фипронил, сулфидних, сулфонских и десулфинилних група [22,1±8,78 нг/Л (95% ЦИ, 11,4 до 46,2), 16,9±3,38 нг/Л (95% ЦИ, 11,2 до 24,0), 8 80±. 2,66 нг/Л (95% ЦИ, 5,44 до 15,8) и 83,4±32,9 нг/Л (95% ЦИ, 36,4 до 163)] Ова једињења су значајно нижа од богатства ЕЦ50 таксона (укупан број јединствених таксона) (Табела С1 ; напомене у табели са додатним материјалом су микрограми по литру).
У експерименту мезо-скале, када су изложени (А) фипронилу, (Б) дессулфинил фипронилу, (Ц) фипронил сулфону, (Д) фипронил сулфиду током 30 дана, описана је осетљивост врсте То је ЕЦ50 вредност таксона.Плава испрекидана линија представља 95% ЦИ.Хоризонтална испрекидана линија представља ХЦ5.Вредност ХЦ5 (нг/Л) сваког једињења је следећа: Фипронил, 4,56 нг/Л (95% ЦИ, 2,59 до 10,2);Сулфид, 3,52 нг/Л (1,36 до 9,20);Сулфон, 2,86 нг/Л (1,93 до 5,29);и сулфинил, 3,55 нг/литар (0,35 до 28,4).Имајте на уму да је к-оса на логаритамској скали.
У пет регионалних студија, Фипронил (родитељи) је откривен у 22% од 444 теренска места узорковања (Табела 1).Учесталост детекције флорфениба, сулфона и амида је слична (18% до 22% узорка), учесталост детекције сулфида и десулфинила је нижа (11% до 13%), док су преостали продукти разградње веома високи.Мало (1% или мање) или никада није откривено (Табела 1)..Фипронил се најчешће открива на југоистоку (52% локација), а најмање на северозападу (9% локација), што наглашава варијабилност употребе бензопиразола и потенцијалну рањивост токова широм земље.Деграданти обично показују сличне регионалне обрасце, са највећом учесталошћу детекције на југоистоку, а најнижом у северозападној или приобалној Калифорнији.Измерена концентрација фипронила је била највиша, а затим је следило матично једињење фипронил (90% проценат од 10,8 односно 6,3 нг/Л) (Табела 1) (35).Највећа концентрација фипронила (61,4 нг/Л), дисулфинила (10,6 нг/Л) и сулфида (8,0 нг/Л) утврђена је на југоистоку (у последње четири недеље узорка).Највећа концентрација сулфона утврђена је на западу.(15,7 нг/Л), амид (42,7 нг/Л), дессулфинил флупирнамид (14 нг/Л) и фипронил сулфонат (8,1 нг/Л) (35).Флорфенид сулфон је једино једињење за које је примећено да премашује ХЦ5 (Табела 1).Просечни ΣТУФипронили између различитих региона се веома разликују (Табела 1).Национални просек ΣТУФипронила је 0,62 (све локације, сви региони), а 71 локација (16%) има ΣТУФипронилс> 1, што указује да може бити токсичан за бентоске макробескичмењаке.У четири од пет проучаваних региона (осим средњег запада), постоји значајна веза између СПЕАРпестицида и ΣТУФипронила, са прилагођеним Р2 у распону од 0,07 дуж обале Калифорније до 0,34 на југоистоку (Слика 5).
*Једињења која се користе у мезоскопским експериментима.†ΣТУФипронили, медијана збира јединица токсина [уочена теренска концентрација четири једињења фипронила/концентрација опасности сваког једињења из петог перцентила ССД-инфицираних врста (Слика 4)] За недељне узорке фипронила, последња 4 израчунате су недеље узорака пестицида прикупљених на свакој локацији.‡Број локација на којима се мере пестициди.§90. перцентил се заснива на максималној концентрацији уоченој на лицу места током последње 4 недеље узорковања пестицида.са процентом испитаних узорака.¶ Користите 95% ЦИ вредности ХЦ5 (слика 4 и табела С3, само мезо) да бисте израчунали ЦИ.Дехлорофлупиниб је анализиран у свим регионима и никада није пронађен.НД, није откривено.
Токсична јединица за фипронил је измерена концентрација фипронила подељена са вредношћу ХЦ5 специфичног за једињење, која је одређена помоћу ССД добијеног из експеримента са медијима (видети слику 4).Црна линија, генерализовани адитивни модел (ГАМ).Црвена испрекидана линија има ЦИ од 95% за ГАМ.ΣТУФипронилс се претвара у лог10 (ΣТУФипронилс+1).
Штетни ефекти фипронила на нециљане водене врсте су добро документовани (15, 21, 24, 25, 32, 33), али ово је прва студија у којој је он осетљив у контролисаном лабораторијском окружењу.Заједнице таксона су биле изложене једињењима фипронила, а резултати су екстраполирани на континенталној скали.Резултати 30-дневног мезокосмичког експеримента могу произвести 15 дискретних група водених инсеката (Табела С1) са концентрацијом која није пријављена у литератури, међу којима су водени инсекти у бази података о токсичности недовољно заступљени (53, 54).Криве дозе-одговора специфичне за таксоне (као што је ЕЦ50) одражавају се у променама на нивоу заједнице (као што је богатство таксона и губитак бројности лета) и функционалним променама (као што су каскаде у исхрани и промене у изгледу).Ефекат мезоскопског универзума је екстраполиран на поље.У четири од пет истраживачких области у Сједињеним Државама, на терену измерена концентрација фипронила била је у корелацији са опадањем воденог екосистема у текућој води.
Вредност ХЦ5 од 95% врста у експерименту са средњом мембраном има заштитни ефекат, што указује да су укупне водене заједнице бескичмењака осетљивије на једињења фипронила него што се раније разумело.Добијена вредност ХЦ5 (флорфениб, 4,56 нг/литар; десулфоксиран, 3,55 нг/литар; сулфон, 2,86 нг/литар; сулфид, 3,52 нг/литар) је неколико пута (флорфениб) до три пута више од реда величине (десулфинил ) испод тренутне ЕПА референтне вредности за хроничне бескичмењаке [фипронил, 11 нг/литар;десулфинил, 10,310 нг/литар;сулфон, 37 нг/литар;и сулфид, за 110 нг/литар (8)].Мезоскопски експерименти су идентификовали многе групе које су осетљиве на фипронил уместо оних на које указује ЕПА хронични бескичмењачки бенцхмарк (4 групе које су осетљивије на фипронил, 13 пара десулфинила, 11 пари сулфона и 13 парова) осетљивост на сулфид) (Слика 4 и табела) С1).Ово показује да мерила не могу да заштите неколико врста које се такође примећују у средњем свету, а које су такође распрострањене у воденим екосистемима.Разлика између наших резултата и тренутног мерила је углавном због недостатка података о тестовима токсичности фипронила који се могу применити на низ таксона водених инсеката, посебно када време излагања прелази 4 дана и фипронил се разграђује.Током 30-дневног мезокосмичког експеримента, већина инсеката у заједници бескичмењака била је осетљивија на фипронил од обичног тест организма Астека (ракова), чак и након исправљања Астека. ЕЦ50 из Теике га чини истим након акутне трансформације.(обично 96 сати) до времена хроничне изложености (Слика С7).Постигнут је бољи консензус између експеримента са средњом мембраном и студије објављене у ЕЦОТОКС-у користећи стандардни тест организам Цхирономус дилутус (инсект).Није изненађујуће што су водени инсекти посебно осетљиви на пестициде.Без прилагођавања времена излагања, експеримент на мезо-скали и свеобухватни подаци ЕЦОТОКС базе података показали су да је за многе таксоне уочено да су осетљивији на једињења фипронила од разблаженог клостридија (слика С6).Међутим, прилагођавањем времена излагања, Дилутион Цлостридиум је најосетљивији организам на фипронил (матични) и сулфид, иако није осетљив на сулфон (слика С7).Ови резултати илуструју важност укључивања више врста водених организама (укључујући више инсеката) да би се произвеле стварне концентрације пестицида које могу заштитити водене организме.
ССД метода може заштитити ретке или неосетљиве таксоне чији се ЕЦ50 не може одредити, као што је Цинигмула сп., Исоперла фулва и Брацхицентрус америцанус.ЕЦ50 вредности распрострањености таксона и бројности може летети које одражавају промене у саставу заједнице су у складу са ХЦ50 вредностима ССД за фипронил, сулфон и сулфид.Протокол подржава следећу идеју: ССД метода која се користи за извођење прагова може заштитити целу заједницу, укључујући ретке или неосетљиве таксоне у заједници.Праг водених организама одређен из ССД-а на основу само неколико таксона или неосетљивих таксона може бити у великој мери недовољан за заштиту водених екосистема.Ово је случај за десулфинил (слика С6Б).Због недостатка података у бази података ЕЦОТОКС, ЕПА хронична основна концентрација бескичмењака је 10,310 нг/Л, што је четири реда величине више од 3,55 нг/Л ХЦ5.Резултати различитих скупова одговора таксона произведени у мезоскопским експериментима.Недостатак података о токсичности је посебно проблематичан за разградива једињења (Слика С6), што може објаснити зашто су постојеће водене биолошке мере за сулфон и сулфид око 15 до 30 пута мање осетљиве од вредности ССД ХЦ5 засноване на Цхина Универсе.Предност методе средње мембране је у томе што се вишеструке вредности ЕЦ50 могу одредити у једном експерименту, што је довољно да се формира комплетан ССД (на пример, десулфинил; слика 4Б и слике С6Б и С7Б), и има значајан утицај о природним таксонима заштићеног екосистема Многи одговори.
Мезоскопски експерименти показују да фипронил и његови продукти разградње могу имати очигледне сублеталне и индиректне штетне ефекте на функционисање заједнице.У мезоскопском експерименту, чинило се да свих пет једињења фипронила утичу на појаву инсеката.Резултати поређења између највеће и најниже концентрације (инхибиција и стимулација индивидуалног ницања или промена времена ницања) су у складу са претходно пријављеним резултатима мезо експеримената са инсектицидом бифентрином (29).Појава одраслих јединки обезбеђује важне еколошке функције и може бити измењена загађивачима као што је фипронил (55, 56).Истовремена појава није само критична за репродукцију инсеката и перзистентност популације, већ и за снабдевање зрелих инсеката, који се могу користити као храна за водене и копнене животиње (56).Спречавање ницања клијанаца може негативно утицати на размену хране између водених екосистема и приобалних екосистема и проширити ефекте водених загађивача на копнене екосистеме (55, 56).Смањење бројности стругача (инсеката који једу алге) уочено у експерименту на мезоскали резултирало је смањењем потрошње алги, што је резултирало повећањем хлорофила а (слика 3).Ова трофичка каскада мења проток угљеника и азота у мрежи течне хране, слично студији која је проценила ефекте пиретроид бифентрина на бентоске заједнице (29).Стога, фенилпиразоли, као што су фипронил и производи његове разградње, пиретроиди и можда друге врсте инсектицида, могу индиректно да подстичу повећање биомасе алги и поремећај угљеника и азота у малим токовима.Други утицаји се могу проширити на уништавање циклуса угљеника и азота између водених и копнених екосистема.
Информације добијене из теста средње мембране омогућиле су нам да проценимо еколошку важност концентрација једињења фипронила мерене у великим теренским студијама спроведеним у пет региона Сједињених Држава.У 444 мала тока, 17% просечне концентрације једног или више једињења фипронила (у просеку током 4 недеље) премашило је вредност ХЦ5 добијену из теста медија.Користите ССД из експеримента на мезо-скали да бисте измерену концентрацију једињења фипронила претворили у индекс који се односи на токсичност, односно збир јединица токсичности (ΣТУФипронилс).Вредност 1 указује на токсичност или кумулативна изложеност једињења фипронила премашује познату врсту заштите од 95%.Значајан однос између ΣТУФипронила у четири од пет региона и СПЕАРпестицида индикатора здравља заједнице бескичмењака указује на то да фипронил може негативно утицати на заједнице бентоских бескичмењака у рекама у више региона Сједињених Држава.Ови резултати подржавају хипотезу Волфрам ет ал.(3) Ризик од фенпиразолних инсектицида за површинске воде у Сједињеним Државама није у потпуности схваћен јер се утицај на водене инсекте јавља испод тренутног регулаторног прага.
Већина токова са садржајем фипронила изнад токсичног нивоа налази се у релативно урбанизованом југоисточном региону (хттпс://вебаппс.усгс.гов/рска/#!/регион/СЕСКА).Претходна процена подручја не само да је закључила да је фипронил главни стресор који утиче на структуру заједнице бескичмењака у потоку, већ и да је низак растворени кисеоник, повећани хранљиви састојци, промене протока, деградација станишта и други пестициди и категорија загађивача важна извор стреса (57).Ова мешавина стресора је у складу са „синдромом урбане реке“, што је деградација речних екосистема која се обично примећује у вези са коришћењем урбаног земљишта (58, 59).Знакови коришћења урбаног земљишта у југоисточном региону расту и очекује се да ће се повећати како становништво региона расте.Очекује се да ће се утицај будућег урбаног развоја и пестицида на градско отјецање повећати (4).Ако урбанизација и употреба фипронила наставе да расту, употреба овог пестицида у градовима може све више утицати на поточне заједнице.Иако се у мета-анализи закључује да употреба пољопривредних пестицида угрожава екосистеме глобалног тока (2, 60), претпостављамо да ове процене потцењују укупан глобални утицај пестицида искључујући урбану употребу.
Различити стресори, укључујући пестициде, могу утицати на заједнице макробескичмењака у развијеним сливовима (урбано, пољопривредно и мешовито земљиште) и могу бити повезани са коришћењем земљишта (58, 59, 61).Иако је ова студија користила СПЕАРпестициде индикатор и карактеристике токсичности фипронила специфичне за водене организме како би се смањио утицај збуњујућих фактора, на учинак СПЕАРпестицида индикатора може утицати деградација станишта, а фипронил се може упоредити са другим пестицидима (4, 17, 51, 57).Међутим, модел вишеструког стреса развијен коришћењем теренских мерења из прве две регионалне студије (Средњи запад и Југоисточни) показао је да су пестициди важан узводни стресор за услове заједнице макробескичмењака у мочварним рекама.У овим моделима, важне варијабле за објашњење укључују пестициде (посебно бифентрин), хранљиве материје и карактеристике станишта у већини пољопривредних токова на Средњем западу, и пестициде (посебно фипронил) у већини градова на југоистоку.Промене кисеоника, хранљивих материја и протока (61, 62).Стога, иако регионалне студије покушавају да се позабаве утицајем не-пестицидних стресора на индикаторе одговора и прилагоде предиктивне индикаторе како би описали утицај фипронила, теренски резултати ове анкете подржавају став фипронила.) Требало би да се сматра једним од најутицајнијих извора притиска у америчким рекама, посебно на југоистоку Сједињених Држава.
Појава деградације пестицида у животној средини се ретко документује, али претња за водене организме може бити штетнија од родитељског тела.У случају фипронила, теренске студије и експерименти на мезо-размери су показали да су производи разградње чести као и матично тело у узоркованим токовима и да имају исту или већу токсичност (Табела 1).У експерименту са средњом мембраном, флуоробензонитрил сулфон је био најтоксичнији од проучаваних производа разградње пестицида, био је токсичнији од матичног једињења, а такође је детектован на учесталости сличној оној код матичног једињења.Ако се мере само основни пестициди, потенцијални догађаји токсичности се можда неће приметити, а релативни недостатак информација о токсичности током разградње пестицида значи да се њихова појава и последице могу занемарити.На пример, због недостатка информација о токсичности производа разградње, извршена је свеобухватна процена пестицида у швајцарским токовима, укључујући 134 производа разградње пестицида, а само је матично једињење узето у обзир као матично једињење у његовој процени екотоксиколошког ризика.
Резултати ове процене еколошког ризика показују да једињења фипронила имају штетне ефекте на здравље река, тако да се може разумно закључити да се штетни ефекти могу приметити било где где једињења фипронила прелазе ниво ХЦ5.Резултати мезоскопских експеримената су независни од локације, што указује да је концентрација фипронила и његових производа разградње у многим таксонима тока много нижа него што је претходно забележено.Верујемо да ће се ово откриће вероватно проширити на протобиоту у нетакнутим потоцима било где.Резултати експеримента мезо-размера примењени су на велике теренске студије (444 мала тока састављена од урбаних, пољопривредних и земљишних мешовитих намена у пет главних региона у Сједињеним Државама), и откривено је да концентрација многих токова где је откривен фипронил, очекује се да ће бити Резултирајућа токсичност сугерише да се ови резултати могу проширити и на друге земље у којима се фипронил користи.Према извештајима, број људи који користе Фипронил расте у Јапану, Великој Британији и САД (7).Фипронил је присутан на скоро свим континентима, укључујући Аустралију, Јужну Америку и Африку (хттпс://цохерентмаркетинсигхтс.цом/маркет-инсигхт/фипронил-маркет-2208).Резултати мезо-пољских студија представљених овде указују да употреба фипронила може имати еколошки значај на глобалном нивоу.
За додатне материјале за овај чланак, погледајте хттп://адванцес.сциенцемаг.орг/цги/цонтент/фулл/6/43/еабц1299/ДЦ1
Ово је чланак отвореног приступа који се дистрибуира под условима Цреативе Цоммонс Аттрибутион-Некомерцијалне лиценце, који дозвољава употребу, дистрибуцију и репродукцију у било ком медију, све док коначна употреба није за комерцијалну добит и премиса је да оригинални рад је тачан.Референце.
Напомена: Од вас тражимо само да наведете своју адресу е-поште како би особа коју препоручите на страници знала да желите да види е-пошту и да није нежељена пошта.Нећемо ухватити ниједну адресу е-поште.
Ово питање се користи за тестирање да ли сте посетилац и спречавање аутоматског слања нежељене поште.
Јанет Л. Миллер, Травис С. Сцхмидт, Петер Ц. Ван Метре, Барбара Малер ( Барбара Ј. Малер, Марк В. Сандстром, Лиса Х. Новелл, Дарен М. Царлисле, Патрицк В. Моран
Студије су показале да су уобичајени пестициди који се често откривају у америчким токовима токсичнији него што се раније мислило.
Јанет Л. Миллер, Травис С. Сцхмидт, Петер Ц. Ван Метре, Барбара Малер ( Барбара Ј. Малер, Марк В. Сандстром, Лиса Х. Новелл, Дарен М. Царлисле, Патрицк В. Моран
Студије су показале да су уобичајени пестициди који се често откривају у америчким токовима токсичнији него што се раније мислило.
©2021 Америчко удружење за унапређење науке.Сва права задржана.АААС је партнер ХИНАРИ, АГОРА, ОАРЕ, ЦХОРУС, ЦЛОЦКСС, ЦроссРеф и ЦОУНТЕР.СциенцеАдванцес ИССН 2375-2548.